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1.使用前的檢查
液氮罐在充填液氮之前，首先要檢查外殼有無凹陷，真空排氣口是否完好。若被碰壞，真空度則會降低，嚴重時進氣不能保溫，這樣罐上部會結霜，液氮損耗大，失去繼續使用的價值。其次，檢查罐的內部，若有異物，必須取出，以防內膽被腐蝕。
2.液氮的充填
液氮罐內液氮的貯存使用液氮罐長期貯存物品時，要注意及時補充液氮。填充液氮時要小心謹慎。對于新罐或處于干燥狀態的罐一定要緩慢填充并進行預冷，以防降溫太快損壞內膽，減少使用年限。充填液氮時不要將液氮倒在真空排氣口上，以免造成真空度下降。蓋塞是用絕熱材料制造的，既能防止液氮蒸發，也能起到固定提筒的作用，所以開關時要盡量減少磨損，以延長使用壽命。液氮液面以不低于冷藏物品為宜。檢查液氮貯存量時，可使用稱重法或手電筒照射法，亦可用細木、竹竿插入液氮罐中視其結霜高度(等于液面高度)的方法。但切勿用空心管插入，以免液氮從管內沖出飛濺傷人。
3.使用過程中的檢查
使用過程中要經常檢查。可以用眼觀測也可以用手觸摸外殼，若發現外表掛霜，應停止使用;特別是頸管內壁附霜結冰時不宜用小刀去刮，以防頸管內壁受到破壞，造成真空不良，而是應將液氮取出，讓其自然融化。
4.液氮罐的放置
液氮罐要存放在通風良好的陰涼處，不要在太陽光下直曬。由于其制造精密及其固有特性，無論在使用或存放時，液氮罐均不準傾斜、橫放、倒置、堆壓、相互撞擊或與其他物件碰撞，要做到輕拿輕放并始終保持直立。
5.液氮罐的清洗
一般液氮罐使用一年后，要清洗消毒一次。清洗時要先用中性洗滌劑洗刷，再用不高于40℃的溫水沖洗干凈，將水排凈，用鼓風機吹干，待內膽充分干燥后，才可再充裝液氮。液氮罐內的液氮揮發完后，所剩遺漏物質(如冷凍精子)很快融化，變成液態物質而附在內膽上，會對鋁合金的內膽造成腐蝕，若形成空洞，液氮罐就會報廢，因此液氮罐內液氮耗盡后對罐子進行刷洗是十分必要的。具體的刷洗辦法如下：首先把液氮罐內提筒取出，液氮移出，放置2—3天，待罐內溫度上升到0℃左右，再倒人30℃左右的溫水，用布擦洗。若發現個別融化物質粘在內膽底上，一定要細心洗刷干凈。然后再用清水沖洗數次，之后倒置液氮罐，放在室內安全不宜翻倒處，自然風干，或如前所述用鼓風機風干。注意在整個刷洗過程中，動作要輕慢，倒人水的溫度不可超過40℃，總重不要超過2kg為宜。
6.液氮罐的安全運輸
液氮罐在運輸過程中必須裝在木架內墊好軟墊，并固定好。罐與罐之間要用填充物隔開，防止顛簸撞擊，嚴防傾倒。裝卸車時要嚴防液氮罐碰擊，更不能在地上隨意拖拉，以免減少液氮罐的使用壽命。
注意事項:
1)液氮是低溫制品，在使用過程中要防止凍傷
2)在液氮中操作及存取冷凍物品時速度要快，要注意輕拿輕放，以免內容物解凍，造成不必要的損失。
3)在使用和貯存液氮的房間內，要保持通風良好，以避免空間缺氧，造成窒息。
4)由于液氮不具殺菌性，故接觸液氮的用具要注意消毒。
5)液氮罐在運輸過程中一定要固定好，以防震動和倒翻。
